MicroCal VP-ITC Microcalorimeter

 

MicroCal VP-ITC는 생체분자 상호작용을 라벨 없이, 용액 상태에서 측정하는 등온 적정 열량계로, 결합 친화도(KD/Ka), 화학량론(n), 엔탈피(ΔH), 엔트로피(ΔS)를 한 번의 실험으로 얻는 데 강점이 있습니다.

기능

• 단백질, 항체, 핵산, 지질, 올리고당 등 다양한 생체분자 상호작용 분석에 사용됩니다.

• 반응 중 방출되거나 흡수되는 열을 직접 측정해 결합 파라미터를 산출합니다.

• 시료를 고정하거나 표지하지 않아도 되고, 용액 내에서 바로 측정할 수 있습니다.

• 경쟁 결합법을 쓰면 더 강한 결합도 측정 범위를 넓힐 수 있습니다.

사용법

1. 샘플 셀에 분석할 수용액을 넣습니다.

2. 주사기에는 적정할 리간드 또는 상호작용 파트너 용액을 넣습니다.

3. 온도, 주입 횟수, 주입량, 혼합 조건을 설정합니다.

4. 장비가 자동으로 주입하면서 발생 열을 측정하고, 이후 Origin 소프트웨어 등으로 적합 모델을 사용해 분석합니다.

5. 실험 전에는 버퍼 매칭, 기포 제거, 농도 설정이 중요합니다.

사용처

• 제약·바이오 연구소에서 hit validation, lead optimization, 결합 기전 확인에 많이 씁니다.

• 항체-항원, 단백질-리간드, 효소-저해제, 핵산 결합 연구에 적합합니다.

• 대학 공동기기실, 단백질 구조생물학, 약물개발 코어 시설에서 흔히 볼 수 있습니다.

MicroCal VP-ITC is an isothermal titration calorimeter (ITC) designed to measure biomolecular interactions in solution without the need for labeling. Its key advantage is the ability to determine binding affinity (KD/Ka), stoichiometry (n), enthalpy (ΔH), and entropy (ΔS) from a single experiment.

Features

• Used to analyze a wide range of biomolecular interactions, including proteins, antibodies, nucleic acids, lipids, and oligosaccharides.
• Directly measures the heat released or absorbed during binding reactions to calculate interaction parameters.
• Requires no immobilization or labeling of samples, allowing measurements to be performed directly in solution.
• Competitive binding methods can be employed to extend the measurable range for very tight interactions.

How to Use

1. Fill the sample cell with the solution containing the molecule of interest.
2. Load the syringe with the ligand or interaction partner solution.
3. Set the experimental parameters, including temperature, number of injections, injection volume, and mixing conditions.
4. The instrument automatically performs titrations and records the heat generated or absorbed during each injection.
5. Analyze the resulting data using software such as Origin, applying an appropriate binding model to determine thermodynamic parameters.

Important: Prior to the experiment, proper buffer matching, removal of air bubbles, and accurate concentration preparation are critical for obtaining reliable results.

Applications

• Widely used in pharmaceutical and biotechnology research laboratories for hit validation, lead optimization, and characterization of binding mechanisms.
• Ideal for studying antibody–antigen interactions, protein–ligand binding, enzyme–inhibitor interactions, and nucleic acid binding.
• Commonly found in university core facilities, protein structural biology laboratories, and drug discovery research centers.